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ELISA试剂盒方法设计的原理根据什么来判断
发布时间:2019-07-23   点击次数:83次

ELISA试剂盒在的实践运用中,通过不同的规划,详细的方法步骤可有多种。如双抗体夹心法、间接法、竞争法、双位点一步法、捕获法测IgM抗体、运用亲和素和生物素的ELISA。在今天的技术内容中,上海通蔚生物公司为您详解ELISA方法规划的原理依据。

ELISA试剂盒以免疫学反应为根底,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体-聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗刷除去剩余的游离反应物,从而确保试验结果的特异性与稳定性。
运用双抗体夹心法测定标本水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入,再与HRP符号的抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,通过完全洗刷后加底物TMB显色。

ELISA试剂盒TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线核算样品的浓度。
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上海通蔚生物科技有限公司

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