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ELISA试剂盒介绍和操作步骤
发布时间:2019-05-16   点击次数:241次

ELISA中有三个必要的试剂:免疫吸附剂、结合物和酶的底物等
完整的ELISA试剂盒包含以下各组分:
1.已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂)
2.酶标记的抗原或抗体(结合物);
3.酶的底物;
4.阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);
5.结合物及标本的稀释液;
6.洗涤液
7.酶反应终止液。
 ELISA试剂盒操作步骤:
1. 加标准品:在酶标包被板上设标准品孔,依次加入不同浓度的标准品50ul(建议每个浓度做2个平行孔)
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品40μl,然后再加样品亲和素10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:除空白孔外每孔加入酶标试剂50μl。

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