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大鼠ELISA试剂盒试验注意事项有哪些?
发布时间:2019-01-03   点击次数:443次

或许,人生的每一次蜕变,都是触目惊心的。从前,我认为有些河流,我永远趟不过去,有些山峰,我永远不能翻越。不曾想,自己竟然是如此的英勇。或许,人生有太多或许了,上海通蔚生物的小编带您了解大鼠ELISA试剂盒试验留意事项有哪些?
在ELISA试验前的留意事项
 1、仔细阅读阐明书
 2、确定试剂盒在有效期内
 3、按阐明书确定一切试剂完全(数量、体积)
 4、标本制备要规范,每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备(贮存),尽量分装做备份。短期内无法试验者,留意低温保存
 5、准备好一切试验额外所需物品,如试管、吸头、移液器、离心机等
6、根据检测标本数量确定所需试剂的量
 7、按阐明书将所用试剂平衡至室温,配制所需试剂
 ELISA试验时,留意事项如下:
 1.正式试验时,应别离以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以确保试验
成果的准确性。有时本底较高,阐明有非特异性反应,可选用羊血清、兔血清或BSA等关闭。
 2.在ELISA中,进行各项试验条件的挑选是很重要的,其中包括:
 (1)固相载体的挑选:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行挑选:用等量抗原包被,在同一试验条件下进行反应,调查其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2)包被抗体(或抗原)的挑选:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时刻及其蛋白量也有一定影响,一般多选用4℃18~24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,调查阳性标本的OD值。挑选OD值大而蛋白量少的浓度。关于大都蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
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